Продукты

Биологическая активность: BCIP (п-толуидиновая соль BCIP; п-толуидиновая соль X-фосфата) является хромогенным субстратом для колориметрического определения активности щелочной фосфатазы.

Шига-токсины (Stxs) продуцируются энтерогеморрагической кишечной палочкой (EHEC), вызывающей инфекции у человека, часто с летальным исходом.Клеточные линии Vero, полученные из почек африканской зеленой мартышки, представляют собой золотой стандарт для определения цитотоксического действия Stxs.Несмотря на их глобальное использование, знания о точных структурах гликосфинголипидов рецепторов Stx (GSL) и их сборке в липидных рафтах недостаточны.Здесь мы представляем всесторонний структурный анализ GSL рецепторов Stx и их распределение в устойчивых к детергентам мембранах (DRM), которые были приготовлены из клеток Vero-B4 и использованы в качестве эквивалентов липидных рафтов.Мы идентифицировали глоботриаозилцерамид (Gb3Cer) и глоботетраозилцерамид (Gb4Cer) в качестве рецепторов GSL для подтипов Stx1a, Stx2a и Stx2e, используя обнаружение наложения ТСХ в сочетании с МС.Необычный рецептор Stx, глобопентаозилцерамид (Gb5Cer, Galβ3GalNAcβ3Galα4Galβ4Glcβ1Cer), который был специфически распознан (в дополнение к Gb3Cer и Gb4Cer) Stx2e, был полностью структурно охарактеризован.Было обнаружено, что липоформы GSL рецептора Stx в основном содержат церамидные фрагменты, состоящие из сфингозина (d18:1) и жирных кислот C24:0/C24:1 или C16:0.Более того, совместное появление маркеров липидного рафта, SM и холестерина, в DRMs предполагает ассоциацию GSL с мембранными микродоменами.Это исследование обеспечивает основу для дальнейшего изучения функционального воздействия рецепторов Stx, связанных с липидным рафтом, на опосредованное токсинами повреждение клеток Vero-B4.