Продукты

CTP: фосфохолинцитидилилтрансфераза α (CCTα) представляет собой ядерный фермент, который катализирует лимитирующую стадию CDP-холинового пути синтеза фосфатидилхолина (PC).Липидная активация CCTα приводит к его перемещению в ядерную оболочку и расширению сети внутриядерных мембран, называемой нуклеоплазматическим ретикулумом (NR), по механизму, включающему деформацию мембраны.Ядерные ламины также необходимы для стабильности и пролиферации NR, но нужна ли эта уникальная структура или ядерная ламина в целом для синтеза PC, неизвестно.Чтобы изучить эту взаимосвязь, ядерная пластинка была истощена РНКи или разрушена экспрессией мутантного ламина А синдрома Хатчинсона-Гилфорда (HGPS) прогерии (прогерин), и было проанализировано влияние на CCTα и метаболизм холина.Опосредованное siRNA молчание ламина A/C или ламина B1 в клетках CHO для уменьшения NR не влияло на синтез PC, в то время как двойной нокдаун неспецифически ингибировал этот путь.Подтверждая его незначительную роль в синтезе ФХ, в НР было обнаружено только 10% транзиентно сверхэкспрессированной холин/этаноламинфосфотрансферазы.В клетках CHO CCTα был нуклеоплазматическим и локализовался совместно с GFP-прогерином в ядерных складках и инвагинациях;однако фибробласты HGPS обнаруживали аномальное распределение CCTα в цитоплазме и ядерной оболочке, что сопровождалось двукратным снижением синтеза PC.Несмотря на его измененную локализацию, эксперименты по мечению холина показали, что активность CCT не изменилась, а ингибирование синтеза PC было связано со снижением активности гемихолинийчувствительного переносчика холина.Мы пришли к выводу, что CCTα и ламины специфически взаимодействуют для формирования NR, но общая структура ядерной оболочки оказывает минимальное влияние на активность CCT и синтез PC.