Продукты

Дефицит карбамоилфосфатсинтетазы 1 (CPS1) из-за мутаций CPS1 является редким аутосомно-рецессивным нарушением цикла мочевины, вызывающим гипераммониемию, которая может привести к смерти или тяжелым неврологическим нарушениям.CPS1 катализирует образование карбамоилфосфата из аммиака, бикарбоната и двух молекул АТФ и требует наличия аллостерического активатора N-ацетил-L-глутамата.Клинические мутации происходят во всей области, кодирующей CPS1, но в основном в отдельных семьях с небольшим рецидивом.Мы охарактеризовали здесь единственную известную в настоящее время рецидивирующую мутацию CPS1, p.Val1013del, обнаруженную у одиннадцати неродственных пациентов турецкого происхождения с использованием рекомбинантного His-меченого дикого типа или мутантного CPS1, экспрессируемого в системе бакуловирус/клетки насекомых.Были проанализированы глобальная реакция CPS1 и парциальные реакции синтеза АТФазы и АТФ, которые отражают, соответственно, стадии фосфорилирования бикарбоната и карбамата.Мы обнаружили, что CPS1 дикого типа и мутант V1013del демонстрируют сопоставимые уровни экспрессии и чистоты, но мутантный CPS1 не проявляет значительной остаточной активности.В структурной модели CPS1 V1013 принадлежит высокогидрофобной β-цепи в середине центрального β-листа субдомена A домена фосфорилирования карбамата и близок к предсказанному карбаматному туннелю, который связывает оба сайта фосфорилирования.Исследования гаплотипов показали, что p.Val1013del является мутацией-основателем.В заключение, мутация p.V1013del инактивирует CPS1, но не делает фермент крайне нестабильным или нерастворимым.Повторение этой конкретной мутации у турецких пациентов, вероятно, связано с эффектом основателя, который согласуется с частым родством, наблюдаемым в пораженной популяции.