Продукты

Индоламин-2,3-диоксигеназа (IDO1) и триптофан-2,3-диоксигеназа (TDO) представляют собой два структурно различных фермента, которые имеют различное распределение в тканях и физиологические роли, но оба катализируют превращение триптофана в N-формилкинуренин (NFK).IDO1 был клинически подтвержден как низкомолекулярная лекарственная мишень для лечения рака, в то время как доклинические исследования показывают, что TDO может быть мишенью для иммунотерапии рака и нейродегенеративных заболеваний.Мы разработали высокопроизводительный анализ для скрининга IDO1 и TDO на основе нового химического зонда NFK Green, который специфически реагирует с NFK с образованием зеленой флуоресцентной молекулы с длиной волны возбуждения 400 нм и длиной волны излучения 510 нм.Мы приводим первое параллельное сравнение ряда опубликованных ингибиторов IDO1 и TDO и показываем, что доклинический ингибитор IDO1, соединение 5l, проявляет значительную перекрестную реактивность с TDO, в то время как относительная селективность других опубликованных ингибиторов была подтверждена.Пригодность для высокопроизводительного скрининга анализов была продемонстрирована путем скрининга библиотеки из 87 000 химических веществ в 384- или 1536-луночном формате.Наконец, мы демонстрируем, что анализ также можно использовать для измерения способности клеток метаболизировать триптофан и для измерения клеточной активности ингибиторов IDO1 и TDO.