Продукты

В последнее время часто возникают вопросы: 1. Почему тест ONPG можно использовать для выявления замедленного брожения лактозы?2. Почему в национальном стандарте указано, что для теста ONPG необходимо использовать 3% трисахарида железа (или трисахарида железа) хлорида натрия?3. Почему для Vibrio parahaemolyticus при проведении теста OPNG толуол следует добавлять по каплям согласно стандарту?Какова функция?

Наша компания рассмотрела большое количество информации, обобщила ее и поделилась с вами ниже:

Принцип: китайское название ONPG — о-нитробензол-β-D-галактопиранозид.ONPG может гидролизоваться в галактозу и желтый о-нитрофенол (ONP) с помощью β-галактозидазы, поэтому активность β-галактозидазы можно определить по изменению цвета культуральной среды.

Лактоза — это сахар, который необходимо обнаруживать большинству микроорганизмов.Для его метаболизма необходимы два фермента, один из которых — клеточная пермеаза, лактоза поступает в клетки под действием пермеазы;другой - β-галактозидаза, гидролизующая лактозу в галактозу.Лактоза и глюкоза.β-Галактозидаза также может непосредственно воздействовать на ONPG, гидролизуя его до галактозы и желтого о-нитрофенола (ONP).Это можно сделать за 24 часа, даже с ферментерами замедленного действия лактозы.Таким образом, это объясняет результаты наблюдения за сбором культуры 1 со скошенного агара и инокуляцией ее по полному кругу при 36°C в течение 1-3 часов и 24 часов.Если вырабатывается β-галактозидаза, то она желтеет через 1-3 часа, если такого фермента нет, то через 24 часа она не меняет окраску.

По указанным выше двум ферментам микроорганизмы можно разделить на следующие категории:

1 лактозоферментирующие (18-24 часа) бактерии с пермеазой и β-галактозидазой P+G+;

2 Ферментеры с замедленным ферментированием лактозы (более 24 часов) без пермеазы, но с галактозидазой: P-G+.

3 Ферментеры без лактозы, в которых отсутствуют как пермеаза, так и галактозидаза: P-G-.

Тест ONPG можно использовать для отличия бактерий, ферментирующих лактозу (P-G+), от неферментирующих лактозобактерий (PG-), таких как:

1. Отличие поздних ферментаторов лактозы (P-G+) от нелактозных ферментеров (P-G-).

(а) Citrobacter (+) и Salmonella arizonae (+) из Salmonella (-).

(б) Escherichia coli (+) от Shigella sonnei (-).

Почему анализ ONPG выполняли с использованием ночной культуры на 3% трисахарида железа хлорида натрия (трисахарида железа)?Наша компания проконсультировалась с большим количеством информации, но нет четкого заявления.Только на веб-сайте FDA написано, что «Инокулировать культуры для тестирования на скошенный агар с тройным сахаром и железом и инкубировать в течение 18 ч при 37°C (или другой подходящей температуре, если требуется). Питательный (или другой) скошенный агар, содержащий 1,0 % лактозы также можно использовать».средства: тест-бактерии инокулировали на среду с трисахаридным железом и культивировали при 37°С в течение 18 часов.Питательная агаровая (или другая) скошенная среда, содержащая 1% лактозы, также приемлема.Таким образом, предполагается, что среда с трисахаридным железом содержит лактозу.После ночного роста бактерии продуцировали хорошую активную β-галактозидазу.Используя такие бактерии, ONPG может быстрее разлагаться β-галактозидазой.Экспериментальное явление быстрее и лучше проявляется.Кроме того, добавление толуола по каплям и водяная баня в течение 5 минут необходимы для полного высвобождения β-галактозидазы.