Продукты

LecA (PA-IL) представляет собой цитотоксический лектин и адгезин, продуцируемый Pseudomonas aeruginosa, который связывает гидрофобные галактозиды с высокой специфичностью и аффинностью.Используя слияние трансляции lecA-egfp и иммуноблот-анализ внеклеточного матрикса биопленки, мы показываем, что lecA экспрессируется в клетках, выращенных в биопленке.В статических анализах биопленки как на полистироле, так и на нержавеющей стали глубина биопленки и покрытие поверхности были уменьшены за счет мутации lecA и увеличены у штамма PAO-P47, избыточно продуцирующего LecA.Покрытие поверхности биопленки исходным штаммом PAO-P47, но не мутантом lecA на стальных образцах, также ингибировалось ростом в присутствии либо изопропил-бета-D-тиогалактозида (IPTG), либо п-нитрофенил-альфа-D-галактозида ( НПГ).Кроме того, зрелые биопленки дикого типа, образованные в отсутствие этих гидрофобных галактозидов, могут быть рассеяны добавлением IPTG.Напротив, добавление п-нитрофенил-альфа-L-фукозы (NPF), которая обладает высоким сродством к лектину P. aeruginosa LecB (PA-IIL), не влияло на образование или распространение биопленки.На рост планктона P. aeruginosa PAO1 не влияло присутствие IPTG, NPG или NPF, а штамм не мог использовать эти сахара в качестве источников углерода, что позволяет предположить, что наблюдаемые эффекты на образование биопленки были обусловлены конкурентным ингибированием LecA-лиганда. привязка.Аналогичные результаты были также получены для биопленок, выращенных в условиях динамического потока на стальных образцах, что позволяет предположить, что LecA вносит вклад в архитектуру биопленки P. aeruginosa в различных условиях окружающей среды.

В листьях растений арабидопсиса обнаружена альфа-L-фукозидаза (КФ 3.2.1.51), способная высвобождать t-фукозильный остаток из боковой цепи олигосахаридов ксилоглюкана.Кроме того, альфа-L-фукозидаза с аналогичной субстратной специфичностью была очищена из листьев капусты (Brassica oleracea) для получения одной полосы в SDS-PAGE.Из этой белковой полосы были получены две пептидные последовательности, и они были использованы для идентификации гена арабидопсиса, кодирующего альфа-фукозидазу, которую мы предлагаем назвать AtFXG1.Кроме того, был обнаружен ген арабидопсиса, гомологичный известным альфа-L-фукозидазам, и мы предложили назвать его AtFUC1.Как AtFXG1, так и ATFUC1 гетерологично экспрессировались в клетках Pichia pastoris, а активность альфа-L-фукозидазы секретировалась в культуральную среду.Альфа-L-фукозидаза, кодируемая AtFXG1, была активна против олигосахаридов из ксилоглюкана XXFG, а также против 2'-фукозиллактитола, но не против п-нитрофенил-альфа-L-фукопиранозида.Однако гетерологически экспрессируемый AtFUC1 был активен только против 2'-фукозиллактитола.Таким образом, первое должно быть связано с метаболизмом ксилоглюкана.