Продукты

PIPES [пиперазин-N,N'-бис(2-этансульфоновая кислота)] часто используется в качестве буферного агента в биохимии.Это буфер на основе этансульфоновой кислоты, разработанный Good et al.в 1960-х годах.PIPES имеет pKa, близкую к физиологическому pH, что делает его пригодным для работы с клеточными культурами.Было задокументировано, что он минимизирует потерю липидов при гистологическом буферировании глутаральдегида в тканях растений и животных. Буферный агент с pKa, близким к физиологическому pH.

Антимикробный пептид магаинин 2 образует поры в липидных мембранах и индуцирует мембранную проницаемость клеточного содержимого.Хотя это проникновение, вероятно, является основной причиной его бактерицидной активности, механизм образования пор остается плохо изученным.Поэтому мы подробно исследовали взаимодействие магаинина 2 с липидными мембранами, используя одиночные гигантские однослойные везикулы (GUV).Связывание магаинина 2 с липидной мембраной ГУВ увеличивало относительное изменение площади мембраны δ, которое было пропорционально поверхностной концентрации магаинина 2, X. Это указывает на то, что константа скорости магаинина 2-индуцируемого двух -переход из интактного состояния в пористое сильно увеличивается с увеличением δ.Натяжение липидной мембраны после аспирации GUV также активировало образование пор, индуцированное магаинином 2.Чтобы выявить местонахождение магаинина 2, с помощью конфокальной микроскопии исследовали взаимодействие меченного карбоксифлуоресцеином (CF) магаинина 2 (CF-магаинина 2) с одиночными GUV, содержащими водорастворимый флуоресцентный зонд AF647.При отсутствии натяжения за счет аспирации после взаимодействия магаинина 2 интенсивность флуоресценции ободка ГУВ за счет CF-магаинина 2 быстро возрастала до стационарного значения, которое оставалось постоянным в течение длительного времени, а за 4-32 с до к началу утечки AF647 интенсивность обода начала быстро увеличиваться до другого устойчивого значения.Напротив, при наличии напряжения не наблюдалось увеличения интенсивности обода непосредственно перед началом утечки.Эти результаты показывают, что магаинин 2 не может перемещаться из внешнего монослоя во внутренний вплоть до образования пор.Основываясь на этих результатах, мы делаем вывод, что пора, индуцированная магаинином 2, представляет собой пору, активируемую растяжением, а растяжение внутреннего монослоя является основной движущей силой образования пор.