Продукты

В настоящем исследовании описывается простой и эффективный метод, использующий высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ) в сочетании с флуоресцентным обнаружением для определения кинетических параметров поглощения глутамата в нервной ткани.Ткань сетчатки, полученную от 7-дневных цыплят, инкубировали с известными концентрациями глутамата (50-2000 мкМ) в течение 10 мин и измеряли уровни нейротрансмиттера, производного о-фтальдегида (ОФА), в инкубационной среде.Оценивая разницу между начальной и конечной концентрацией глутамата в среде, охарактеризовали насыщаемый механизм поглощения (K(m)=8,2 и V(max)=9,8 нмоль/мг белка/мин).Эта мера в значительной степени зависела от натрия и температуры, что убедительно подтверждает, что механизм снижения концентрации действительно связан с поглощением транспортерами с высоким сродством.В дополнение к этому наши результаты также показали, что хлорид цинка (ингибитор транспортеров глутамата/аспартата) вызывал зависимое от концентрации снижение поглощения глутамата, демонстрируя специфичность нашей методологии.В целом, настоящая работа характеризует альтернативную методологию оценки поглощения глутамата нервной тканью с помощью ВЭЖХ.Этот подход может быть важным инструментом для исследований, связанных с характеристикой незначительных изменений в транспорте глутамата, связанных с повреждением центральной нервной системы.