Продукты

1. Мы изучили ингибирующее действие изорамнетина на тирозиназу грибов с помощью кинетики ингибирования и компьютерного моделирования.Изорамнетин обратимо ингибировал тирозиназу по смешанному типу при Ki=0,235±0,013 мМ.Измерения собственной флуоресценции и флуоресценции, связывающей 1-анилинонафталин-8-сульфонат (ANS), показали, что изорамнетин не вызывает значительных изменений в третичной структуре тирозиназы.Чтобы получить представление о процессе инактивации, кинетика была рассчитана с помощью измерений временных интервалов и непрерывных реакций субстрата.Результаты показали, что инактивация, индуцированная изорамнетином, была реакцией первого порядка с двухфазными процессами.Чтобы получить более глубокое представление, мы смоделировали стыковку между тирозиназой и изорамнетином.Моделирование было успешным (энергия связывания для Dock6.3: -32,58 ккал/моль, для AutoDock4.2: -5,66 ккал/моль и для Fred2.2: -48,86 ккал/моль), что позволяет предположить, что изорамнетин взаимодействует с несколькими остатками, такими как как HIS244 и MET280.Эта стратегия предсказания взаимодействия тирозиназы в сочетании с кинетикой, основанной на соединении флаванона, может оказаться полезной при скрининге потенциальных природных ингибиторов тирозиназы.

2. Путь кислотного развертывания кональбумина (CA), мономерного гликопротеина из куриного яичного белка, был исследован с использованием КД-спектроскопии в дальнем и ближнем УФ, испускания собственной флуоресценции, зонда внешней флуоресценции 1-анилино-8-нафталинсульфоната (ANS). и динамическое рассеяние света (DLS).Мы наблюдаем рН-зависимые изменения вторичной и третичной структуры КА.Он имеет нативную α-спиральную вторичную структуру при pH 4,0, но теряет структуру при pH 3,0.СА существует исключительно в виде предрасплавленной глобулы и расплавленной глобулы в растворе при рН 4,0 и рН 3,0 соответственно.Влияние рН на конформацию и термостабильность КА указывает на его термостойкость при нейтральном рН.Результаты DLS показывают, что состояние MG существует в виде компактной формы в водных растворах с гидродинамическим радиусом 4,7 нм.Тушение флуоресценции триптофана акриламидом дополнительно подтвердило накопление промежуточного состояния, частично развернутого, между нативным и развернутым состояниями.