Продукты

Сосудистая гиперпроницаемость способствует заболеваемости при воспалении.Существующие методики оценки проницаемости in vivo, основанные на экстравазации альбумина, связанного с Evans Blue (EB), громоздки и часто лишены чувствительности.Мы разработали новую методологию инфракрасной флуоресценции (IRF) для измерения экстравазации EB-альбумина для количественной оценки проницаемости сосудов на мышиных моделях.Сосудистую проницаемость, вызванную эндотоксемией, исследовали для всех твердых органов, головного мозга, кожи и брюшины с помощью IRF и традиционного измерения EB на основе поглощения в тканевых экстрактах.ИРФ органов линейно увеличивалась с увеличением концентрации внутривенного ЭБ (2,5-25 мг/кг).Тканевой IRF был более чувствителен к накоплению EB по сравнению с методом, основанным на поглощении.Соответственно, различия в проницаемости сосудов и накоплении EB в органах между мышами, получавшими липополисахарид и физиологический раствор, часто были значительными при анализе с помощью обнаружения на основе IRF, но не обнаружения на основе поглощения.БЭ был обнаружен во всех 353 органах, проанализированных с помощью ИРФ, но только в 67% (239/353) органов, проанализированных с помощью методологии на основе поглощения, что демонстрирует улучшенную чувствительность обнаружения БЭ в органах с ИРФ.Напротив, ЭБ в плазме после введения ЭБ легко измеряли обоими методами с высокой корреляцией между двумя методами (n = 116, r2 = 0,86).Количественная оценка органоспецифических различий EB-IRF из-за эндотоксина была оптимальной, когда IRF сравнивали между мышами, сопоставимыми по весу, полу и возрасту, и с соответствующими поправками на вес органа и концентрации EB в плазме.Примечательно, что методология EB-IRF оставляет органы нетронутыми для последующей гистопатологии.Таким образом, EB-IRF представляет собой новый, высокочувствительный, быстрый и удобный метод относительного количественного определения EB в интактных органах лечения по сравнению с контрольными мышами.