Продукты

Мы разработали новую систему доставки малых интерферирующих РНК (siRNA) с использованием тройного комплекса с полиэтиленимином (PEI) и γ-полиглутаминовой кислотой (γ-PGA), которая показала эффект молчания и не имела цитотоксичности.Бинарные комплексы миРНК с ПЭИ имели размер частиц примерно 73–102 нм и ζ-потенциал 45–52 мВ.Сайленсинговый эффект комплексов siRNA/PEI увеличивался с увеличением PEI, а комплексы siRNA/PEI с отношением зарядов более 16 показали значительный нокдаун люциферазы в клеточной линии карциномы толстой кишки мыши, регулярно экспрессирующей люциферазу (клетки Colon26/Luc).Однако в комплексе миРНК/липофектамин и комплексе миРНК/PEI16 наблюдали сильную цитотоксичность и агглютинацию крови.Сообщается, что перезарядка катионных комплексов анионным соединением является многообещающим методом преодоления этой токсичности.Поэтому мы подготовили тройные комплексы миРНК с ПЭИ (коэффициент заряда 16) путем добавления γ-PGA для снижения цитотоксичности и доставки миРНК.Как и ожидалось, цитотоксичность тройных комплексов снижалась с увеличением содержания γ-PGA, что снижало ζ-потенциал комплексов.Сильный сайленсинговый эффект, сравнимый с комплексом миРНК/липофектамин, был обнаружен в тройных комплексах, включающих γ-PGA с анионным поверхностным зарядом.Высокое включение тройных комплексов в клетки Colon26/Luc было подтверждено с помощью флуоресцентной микроскопии.Достигнув нокдауна экзогенно трансфицированного гена, оценивали способность комплекса опосредовать нокдаун эндогенного гена домашнего хозяйства, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы (GAPDH), в клетках B16-F10.Тройной комплекс (комплекс siRNA/PEI16/γ-PGA12) проявлял значительный эффект нокдауна GAPDH.Таким образом, мы разработали полезную систему доставки миРНК.