Продукты

Накопление в ядре мутантной формы ядерного белка ламина-А, называемого прогерином (PG) или ламин A∆50, происходит при синдроме Хатчинсона-Гилфорда прогерия (HGPS) или прогерии, болезни ускоренного старения.Одним из основных симптомов этого генетического нарушения является потеря подкожного жира из-за резкой липодистрофии. Мы стабильно индуцировали экспрессию человеческого PG и GFP - зеленого флуоресцентного белка в качестве контроля в клетках 3T3L1, используя лентивирусную систему для изучения влияние экспрессии PG на способность к дифференцировке этой клеточной линии, одной из наиболее часто используемых адипогенных моделей.Для изучения эффекта накопления PG была проведена количественная протеомика (iTRAQ).Некоторые из модулированных белков были подтверждены с помощью иммуноблоттинга и ПЦР в реальном времени.Функцию митохондрий анализировали путем измерения а) базальной активности митохондрий, б) продукции супероксидных анионов и в) индивидуальной эффективности различных комплексов дыхательной цепи. снижение скорости пролиферации и дефекты адипогенной способности по сравнению с контролем.Количественный протеомный анализ показал, что 181 белок значительно (p<0,05) модулирован в преадипоцитах, экспрессирующих PG.Митохондриальная функция нарушена в клетках, экспрессирующих PG.В частности, мы обнаружили увеличение активности комплекса I и перепроизводство супероксид-аниона.Инкубация с агентами-поглотителями реактивных форм кислорода (АФК) приводит к снижению аутофагического протеолиза, как показывает соотношение LC3-II/LC3-I. Экспрессия PG в клетках 3T3L1 способствует изменениям в нескольких биологических процессах, включая структуру цитоскелета, метаболизм липидов, кальций регуляция, трансляция, сворачивание белков и выработка энергии митохондриями.Наши данные подтверждают вклад накопления АФК в фенотип преждевременного старения и устанавливают связь между митохондриальной дисфункцией и потерей протеостаза при HGPS.