Продукты

Сообщалось, что мезенхимальные стволовые клетки (МСК) являются привлекательным источником для получения трансплантируемых суррогатных β-клеток.Линия мышиных эмбриональных мезенхимальных клеток-предшественников C3H10T1/2 была признана моделью для МСК из-за ее потенциала дифференцировки в несколько линий.Цель этого исследования заключалась в том, чтобы выяснить, обладают ли клетки C3H/10T1/2 способностью дифференцироваться в клетки, продуцирующие инсулин (IPC).Здесь мы исследовали и сравнили in vitro дифференцировку МСК крысы и клеток C3H10T1/2 в МПК.После того, как клетки подверглись дифференцировке IPC, экспрессию маркеров дифференцировки определяли с помощью иммуноцитохимии, полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (RT-PCR), количественной RT-PCR в реальном времени (qRT-PCR) и вестерн-блоттинга.Секрецию инсулина оценивали с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА).Кроме того, эти дифференцированные клетки были трансплантированы мышам с диабетом, индуцированным стрептозотоцином, и их биологические функции были проверены in vivo.В этом исследовании сообщается о двухэтапном методе получения МПК из клеток C3H10T1/2.В специфических условиях индукции в течение 7-8 дней клетки С3Н10Т1/2 образовывали трехмерные сфероидные тельца (СТ) и секретировали инсулин, тогда как для получения МПК из МСК крысы требовалось длительное время (более 2 недель).Кроме того, эти IPC, полученные из клеток C3H10T1/2, вводили мышам с диабетом, и они улучшали базальный уровень глюкозы, массу тела и демонстрировали нормальный тест на толерантность к глюкозе.Настоящее исследование предоставило простую и достоверную модель in vitro для дальнейшего изучения механизма, лежащего в основе IPC-дифференциации МСК и заместительной клеточной терапии диабета.