Продукты

Активаторы карбоангидразы: первое исследование активации секреторной изоформы VI человека аминокислотами и аминами.

Секреторный изофермент карбоангидразы человека (hCA, EC 4.2.1.1), hCA VI, был клонирован, экспрессирован и очищен в бактериальной системе экспрессии.Кинетические параметры реакции гидратации CO(2) показали, что hCA VI имеет ak(cat) 3,4×10(5)s(-1) и k(cat)/K(M) 4,9×10(7)M. (-1)s(-1) (при рН 7,5 и 20°С).hCA VI обладает значительной каталитической активностью для физиологической реакции того же порядка, что и вездесущая изоформа CA I или трансмембранный, связанный с опухолью изофермент CA IX.Было показано, что ряд аминокислот и аминов действуют как активаторы CA VI с различной эффективностью.l-His, l-Trp и дофамин проявляли слабые активирующие эффекты CA VI (K(A)s в диапазоне 21-42 мкМ), тогда как d-His, d-Phe, l-DOPA, l-Trp, серотонин , а некоторые пиридилалкиламины были лучшими активаторами с K(A)s в диапазоне 13-19 мкМ.Лучшими активаторами CA VI были l-Phe, d-DOPA, l-Tyr, 4-амино-l-Phe и гистамин с K(A)s в диапазоне 1,23-9,31 мкМ.Все эти активаторы усиливают k(cat), не влияя на K(M), участвуя, таким образом, в определяющей скорость стадии каталитического цикла, в реакциях переноса протона между активным центром фермента и окружающей средой.